哪有不疯的研究生 – 第 2 页

苏东坡至今仍为海南发展作出贡献

苏东坡第一次来到儋州开启了海南的文脉

七八百年过去了，还在为海南的文旅事业贡献自己

目前，不论是使用BCA蛋白测定试剂盒，亦或是使用碧云天的BCA多肽测定试剂盒，其在使用非官方提供的标准多肽样品绘制标准曲线时，出现所有浓度梯度都表现出相同吸光度的情况。

该问题出现在一个月之前，在使用飞净生物的BCA蛋白测定试剂盒时，为了使得测定更加准确，变使用化学合成的多肽作为BCA测定的标准样品，以绘制标准曲线。

问题在于，使用RVPSL作为标准样品是，在各个浓度下BCA显色液的显色反应竟是相同的，结果令人十分疑惑。

WHY?

可能是因为96孔板没有洗干净？遂重复测试，结果依旧。

后来，因为实在找不出原因，所以改为紫外法去测试，该问题被搁置下来。

再经过一系列折腾之后，我还是回到了BCA法测多肽含量。

我把上次的结果归根于多肽浓度太低，低于BCA法的检测限，忽略了测定标准曲线时所发生的非低浓度的异常现象，想要使用更加灵敏的试剂盒，这也是后来BCA多肽试剂盒测定失败的原因。

话说后来，碧云天的多肽测定试剂盒在做标准曲线时还是出现出现了所有空的吸光度都一样的情况，包括空白组的PBS

第一列是试剂盒的标准样品，可以看出其吸光度从高往低依次递减，比较符合相关规律。第二列RVPSL标准品不同浓度下所测定在480 nm下的吸光度。

结果令人疑惑，所有浓度下都呈现0.4左右的吸光值，这太反常了，让我想起来之前在BCA蛋白试剂盒时的实验，最后一个是PBS，吸光值竟然和上面的几乎一样。不祥的预感笼罩在心头。

第四列和第五列时我的标准样品，第四列是100KDa超滤管，第五列是10 KDa超滤管。奇怪的是这些样品没有出现和RVPSL相同的吸光值，为什么？貌似挺正常的

根据记忆回忆这些样品的制备到底有哪些不一样的地方

第一列，使用试剂盒所附带的标准样品进行吸光值测试，其稀释所使用的PBS为飞净生物BCA蛋白试剂盒所附带的PBS稀释液。
第二列，标准曲线的绘制采用的是RVPSL标准样品，所溶解的PBS为1X PBS，稀释过程中所用PBS同为净生物BCA蛋白试剂盒所附带的PBS稀释液。
第四列和第五列是不同过滤条件下的样品，其多肽为RVPSL标准样品（这里假定RVPSL的合成没有问题），溶解RVPSL的溶剂为我自配的0.01M pH为6.2的PBS,样品没有经过PBS的稀释，直接进行测定。